stringtranslate.com

Сплайсинг белков

механизм сплайсинга белков с участием интеинов
Механизм сплайсинга белков с участием интеинов. На этой схеме N-экстеин показан красным, интеин черным, а C-экстеин синим. X представляет собой атом кислорода или серы.

Сплайсинг белка — это внутримолекулярная реакция конкретного белка , в которой внутренний сегмент белка (называемый интеином ) удаляется из белка-предшественника с лигированием С-концевых и N-концевых внешних белков (называемых экстеинами ) с обеих сторон. Сплайсинг-соединение белка-предшественника в основном представляет собой цистеин или серин , которые являются аминокислотами , содержащими нуклеофильную боковую цепь . Реакции сплайсинга белка, которые известны сейчас, не требуют экзогенных кофакторов или источников энергии, таких как аденозинтрифосфат (АТФ) или гуанозинтрифосфат (ГТФ). Обычно сплайсинг связан только со сплайсингом пре-мРНК . Этот белок-предшественник содержит три сегмента — N-экстеин , за которым следует интеин, за которым следует С-экстеин . После сплайсинга полученный белок содержит N-экстеин, связанный с С-экстеином; этот продукт сплайсинга также называется экстеином.

История

Первый интеин был обнаружен в 1988 году путем сравнения последовательностей между вакуолярной АТФазой Neurospora crassa [1] и моркови [2] (без интеина) и гомологичным геном в дрожжах (с интеином), который был впервые описан как предполагаемый переносчик ионов кальция . [3] В 1990 году Хирата и др. [4] продемонстрировали, что дополнительная последовательность в гене дрожжей транскрибировалась в мРНК и удалялась из белка хозяина только после трансляции. С тех пор интеины были обнаружены во всех трех доменах жизни (эукариоты, бактерии и археи) и в вирусах .

Сплайсинг белка был неожиданным, и его механизмы были открыты двумя группами (Anraku [5] и Stevens [6] ) в 1990 году. Они обе обнаружили Saccharomyces cerevisiae VMA1 в предшественнике фермента вакуолярной H + -АТФазы . Аминокислотная последовательность N- и C-концов соответствовала 70% последовательности ДНК вакуолярной H + -АТФазы других организмов, тогда как аминокислотная последовательность центрального положения соответствовала 30% общей последовательности ДНК дрожжевой HO нуклеазы .

Многие гены имеют несвязанные сегменты, кодирующие интеины, вставленные в разных позициях. По этим и другим причинам интеины (или, правильнее сказать, сегменты генов, кодирующие интеины) иногда называют эгоистичными генетическими элементами , но, возможно, точнее будет назвать их паразитическими . Согласно геноцентрическому взгляду на эволюцию, большинство генов являются «эгоистичными» только в той мере, в какой они конкурируют с другими генами или аллелями , но обычно они выполняют функцию для организмов, тогда как «паразитические генетические элементы», по крайней мере изначально, не вносят положительного вклада в приспособленность организма. [7] [8]

По состоянию на декабрь 2019 года база данных UniProtKB содержит 188 записей, вручную аннотированных как интеины, начиная от десятков аминокислотных остатков до тысяч. [9] Первый интеин был обнаружен закодированным в гене VMA Saccharomyces cerevisiae . Позже они были обнаружены в грибах ( аскомицеты , базидиомицеты , зигомицеты и хитридиевые грибы ), а также в различных белках. Было описано, что белок, отдаленно связанный с известными интеинами, содержащими белок, но тесно связанный с белками metazoan hedgehog , имеет последовательность интеина из Glomeromycota . Многие из недавно описанных интеинов содержат хоуминговые эндонуклеазы, и некоторые из них, по-видимому, активны. [10] Обилие интеина в грибах указывает на латеральный перенос генов, содержащих интеин. В то время как у эубактерий и архей в настоящее время известно 289 и 182 интеина. Неудивительно, что большая часть интеина у эубактерий и архей, как и у грибов, встроена в метаболический белок нуклеиновой кислоты. [10]

Интеины сильно различаются, но многие из тех же интеин-содержащих белков встречаются у ряда видов. Например, белок фактора 8 пре-мРНК-процессинга ( Prp8 ), играющий важную роль в сплайсосоме , имеет семь различных сайтов вставки интеина у разных видов эукариот. [11] Интеин-содержащий Prp8 чаще всего встречается у грибов, но также встречается у Amoebozoa , Chlorophyta , Capsaspora и Choanoflagellida . Многие микобактерии содержат интеины в DnaB (бактериальная репликативная геликаза), RecA (бактериальная ДНК-рекомбиназа) и SufB ( белок сборки кластера FeS ). [12] [13] Существует замечательное разнообразие в структуре и количестве интеинов DnaB как внутри рода микобактерий, так и за его пределами. Интересно, что интеин-содержащий DnaB также встречается в хлоропластах водорослей. [14] Интеин-содержащие белки, обнаруженные в археях, включают RadA (гомолог RecA), RFC, PolB, RNR. [15] Многие из тех же интеин-содержащих белков (или их гомологов) обнаружены в двух или даже во всех трех доменах жизни. Интеины также обнаружены в протеомах, кодируемых бактериофагами и эукариотическими вирусами. Вирусы могли быть вовлечены в качестве векторов распространения интеинов среди широкого спектра интеин-содержащих организмов. [15]

Механизм

Процесс для интеинов класса 1 начинается со сдвига NO или NS, когда боковая цепь первого остатка ( серин , треонин или цистеин ) интеиновой части белка-предшественника нуклеофильно атакует пептидную связь остатка, расположенного непосредственно выше по течению (то есть конечный остаток N-экстеина), образуя линейный эфир (или тиоэфир ) промежуточного соединения. Трансэтерификация происходит, когда боковая цепь первого остатка C-экстеина атакует новообразованный (тио)эфир, освобождая N-конец интеина. Это образует разветвленное промежуточное соединение, в котором N-экстеин и C-экстеин соединены, хотя и не через пептидную связь. Последний остаток интеина всегда является аспарагином ( Asn), и амидный атом азота этой боковой цепи расщепляет пептидную связь между интеином и C-экстеином, в результате чего образуется свободный сегмент интеина с терминальным циклическим имидом . Наконец, свободная аминогруппа C-экстеина теперь атакует (тио)эфир, связывающий N- и C-экстеины вместе. Сдвиг ON или SN создает пептидную связь и функциональный лигированный белок. [16]

Интеины класса 2 не имеют нуклеофильной первой боковой цепи, только аланин. Вместо этого реакция начинается непосредственно с нуклеофильного замещения, при этом первый остаток C-экстеина атакует пептидный карбоксил на конечном остатке N-экстеина. Остальное происходит как обычно, начиная с превращения Asn в циклический имид. [17]

Интеины класса 3 не имеют нуклеофильной первой боковой цепи, только аланин, однако у них есть внутренний несмежной мотив «WCT». Внутренний остаток C (цистеин) атакует пептидный карбоксил на конечном остатке N-экстеина (нуклеофильное замещение). Трансэтерификация происходит, когда первый остаток C-экстеина атакует новообразованный тиоэстер. Остальное происходит как обычно. [18]

Механизм эффекта сплайсинга представляет собой естественную аналогию с методом химического получения белков среднего размера, называемым нативным химическим лигированием .

Интейн

Интеин — это сегмент белка , способный отщеплять себя и присоединяться к оставшимся частям ( экстеинам ) с помощью пептидной связи во время сплайсинга белка. [19] Интеины также называют белковыми интронами по аналогии с интронами (РНК) .

Сплайсинг интеина происходит посттрансляционно в самокаталитическом процессе. Здесь экстеин показан красным, а интеин — синим. Изображение создано с помощью Biorender.com.

Соглашения об именовании

Первая часть названия интеина основана на научном названии организма , в котором он обнаружен, а вторая часть основана на названии соответствующего гена или экстеина. Например, интеин, обнаруженный в Thermoplasma acidophilum и связанный с субъединицей A вакуолярной АТФазы (VMA), называется «Tac VMA».

Обычно, как в этом примере, для обозначения организма достаточно всего трех букв, но есть и вариации. Например, для обозначения штамма могут быть добавлены дополнительные буквы. Если в соответствующем гене закодировано более одного интеина, интеинам присваивается числовой суффикс, начинающийся с 5 до 3 или в порядке их идентификации (например, «Msm dnaB-1»).

Сегмент гена, кодирующий интеин, обычно имеет то же название, что и интеин, но во избежание путаницы название самого интеина обычно пишется с заглавной буквы ( например , Pfu RIR1-1), тогда как название соответствующего сегмента гена пишется курсивом ( например , Pfu rir1-1 ). Другой способ устранения неоднозначности — поставить строчную букву «i» после названия исходного белка, например , «Msm DnaBi1». [20]

Типы интеинов

Интеины можно классифицировать по многим критериям.

Полные и мини-интеины

Интеины могут содержать домен гена самонаводящейся эндонуклеазы (HEG) в дополнение к доменам сплайсинга. Этот домен отвечает за распространение интеина путем расщепления ДНК на аллеле , свободном от интеина, на гомологичной хромосоме , запуская систему репарации двухцепочечных разрывов ДНК (DSBR), которая затем восстанавливает разрыв, таким образом копируя ДНК, кодирующую интеин, в ранее свободный от интеина сайт. [17] Домен HEG не является необходимым для сплайсинга интеина, и поэтому он может быть потерян, образуя минимальный или мини - интеин . Несколько исследований продемонстрировали модульную природу интеинов путем добавления или удаления доменов HEG и определения активности новой конструкции. [ необходима цитата ]

Разделенные интеины

Иногда интеин белка-предшественника происходит из двух генов. В этом случае интеин называется расщепленным интеином . Например, у цианобактерий DnaE , ​​каталитическая субъединица α ДНК-полимеразы III , кодируется двумя отдельными генами, dnaE-n и dnaE-c . Продукт dnaE-n состоит из последовательности N-экстеина, за которой следует последовательность интеина 123-AA, тогда как продукт dnaE-c состоит из последовательности интеина 36-AA, за которой следует последовательность C-экстеина. [21]

Применение в биотехнологии

Интеины очень эффективны при сплайсинге белков, и, соответственно, они нашли важную роль в биотехнологии . На сегодняшний день идентифицировано более 200 интеинов; размеры варьируются от 100 до 800 аминокислот . Интеины были разработаны для конкретных применений, таких как полусинтез белков [22] и селективная маркировка сегментов белков, что полезно для исследований больших белков методом ЯМР . [23]

Фармацевтическое ингибирование вырезания интеина может быть полезным инструментом для разработки лекарственных препаратов ; белок, содержащий интеин, не будет выполнять свою нормальную функцию, если интеин не будет вырезаться, поскольку его структура будет нарушена.

Было высказано предположение, что интеины могут оказаться полезными для достижения аллотопической экспрессии некоторых высокогидрофобных белков , обычно кодируемых митохондриальным геномом, например, в генной терапии . [24] Гидрофобность этих белков является препятствием для их импорта в митохондрии. Поэтому вставка негидрофобного интеина может позволить осуществить этот импорт. Удаление интеина после импорта затем восстановит белок до дикого типа .

Аффинные метки широко использовались для очистки рекомбинантных белков, поскольку они позволяют накапливать рекомбинантный белок с небольшим количеством примесей. Однако аффинная метка должна быть удалена протеазами на заключительном этапе очистки. Дополнительный этап протеолиза поднимает проблемы специфичности протеазы при удалении аффинных меток из рекомбинантного белка и удалении продукта переваривания. Эту проблему можно избежать, слияя аффинную метку с саморасщепляемыми интеинами в контролируемой среде. Первое поколение векторов экспрессии такого рода использовало модифицированный интеин Saccharomyces cerevisiae VMA (Sce VMA). Чонг и др. [25] использовали домен связывания хитина (CBD) из Bacillus circulans в качестве аффинной метки и слили эту метку с модифицированным интеином Sce VMA. Модифицированный интеин подвергается реакции саморасщепления на своем N-концевом пептидном соединении с 1,4-дитиотреитолом (DTT), β-меркаптоэтанолом (β-ME) или цистеином при низких температурах в широком диапазоне pH. После экспрессии рекомбинантного белка гомогенат клеток пропускается через колонку, содержащую хитин . Это позволяет CBD химерного белка связываться с колонкой. Кроме того, когда температура понижается и молекулы, описанные выше, проходят через колонку, химерный белок подвергается самосплайсингу, и элюируется только целевой белок. Эта новая технология устраняет необходимость в этапе протеолиза, и модифицированный Sce VMA остается в колонке, прикрепленный к хитину через CBD. [25]

Недавно интеины использовались для очистки белков на основе самоагрегирующихся пептидов. Эластиноподобные полипептиды (ELP) являются полезным инструментом в биотехнологии. Слитые с целевым белком, они имеют тенденцию образовывать агрегаты внутри клеток. [26] Это устраняет хроматографический этап, необходимый для очистки белка. Теги ELP использовались в слитом белке интеина, так что агрегаты можно было выделить без хроматографии (центрифугированием), а затем интеин и тег можно было расщепить контролируемым образом, чтобы высвободить целевой белок в раствор. Эту изоляцию белка можно было выполнить с использованием непрерывного потока среды, что давало большое количество белка, что делало этот процесс более экономически эффективным, чем обычные методы. [26] Другая группа исследователей использовала более мелкие самоагрегирующиеся теги для изоляции целевого белка. Небольшие амфипатические пептиды 18A и ELK16 (рисунок 5) использовались для образования саморасщепляющегося агрегирующего белка. [27]

Применение в разработке противомикробных препаратов

За последние двадцать лет возрос интерес к использованию интеинов для антимикробных применений. [12] Сплайсинг интеинов встречается исключительно в одноклеточных организмах, с особенно высоким содержанием в патогенных микроорганизмах. [28] Кроме того, интеины обычно встречаются в белках домашнего хозяйства и/или белках, участвующих в выживании организма в организме человека. Посттрансляционное удаление интеина необходимо для того, чтобы белок правильно сворачивался и функционировал. Например, Гаэль Юэ и др. продемонстрировали, что в Mycobacterium tuberculosis несплайсированный SufB предотвращает образование комплекса SufBCD, компонента механизма SUF. [29] Таким образом, ингибирование сплайсинга интеинов может служить мощной платформой для разработки антимикробных препаратов.

Текущие исследования ингибиторов сплайсинга интеина были сосредоточены на разработке антимикобактериальных препаратов ( M. tb. имеет три белка, содержащих интеин), а также агентов, активных против патогенных грибов Cryptococcus и Aspergillus. [13] Цисплатин и аналогичные соединения, содержащие платину, ингибируют сплайсинг интеина M. tb. RecA посредством координации с каталитическими остатками. [30] Двухвалентные катионы, такие как ионы меди (II) и цинка (II), действуют аналогично, обратимо ингибируя сплайсинг. [12] Однако ни один из этих методов в настоящее время не подходит для эффективного и безопасного антибиотика. Грибковый интеин Prp8 также ингибируется двухвалентными катионами и цисплатином посредством взаимодействия с каталитическим остатком Cys1. [12] В 2021 году Ли и др. показали, что малые молекулярные ингибиторы сплайсинга интеина Prp8 были селективны и эффективны в замедлении роста C. neoformans и C. gattii , предоставив захватывающие доказательства антимикробного потенциала ингибиторов сплайсинга интеина. [31]

Смотрите также

Ссылки

  1. ^ Боумен, Э.Дж.; Тенни, К.; Боумен, Б.Дж. (октябрь 1988 г.). «Выделение генов, кодирующих вакуолярную АТФазу Neurospora. Анализ vma-1, кодирующего субъединицу 67 кДа, выявляет гомологию с другими АТФазами». J Biol Chem . 263 (28): 13994–4001. doi : 10.1016/S0021-9258(18)68175-X . PMID  2971651.
  2. ^ Zimniak, L; Dittrich, P; Gogarten, JP; Kibak, H; Taiz, L (июль 1988 г.). "Последовательность кДНК субъединицы 69-кДа вакуолярной H+-АТФазы моркови. Гомология с бета-цепью F0F1-АТФаз". J Biol Chem . 263 (19): 9102–12. doi : 10.1016/S0021-9258(19)76514-4 . PMID  2897965.
  3. ^ Ши, CK; Вагнер, R; Файнштейн, S; Каник-Эннулат, C; Нефф, N (август 1988 г.). «Доминантный ген устойчивости к трифлуоперазину из Saccharomyces cerevisiae имеет гомологию с F0F1 АТФ-синтазой и обеспечивает рост, чувствительный к кальцию». Mol Cell Biol . 8 (8): 3094–103. doi :10.1128/mcb.8.8.3094. PMC 363536. PMID 2905423  . 
  4. ^ Хирата, Р.; Охсумк, И.; Накано, А.; Кавасаки, Х.; Сузуки, К.; Анраку, И. (апрель 1990 г.). «Молекулярная структура гена VMA1, кодирующего каталитическую субъединицу H(+)-транслоцирующей аденозинтрифосфатазы из вакуолярных мембран Saccharomyces cerevisiae». J Biol Chem . 265 (12): 6726–33. doi : 10.1016/S0021-9258(19)39210-5 . PMID  2139027.
  5. ^ Хирата Р., Охсумк И., Накано А., Кавасаки Х., Сузуки К., Анраку И. (апрель 1990 г.). «Молекулярная структура гена VMA1, кодирующего каталитическую субъединицу H(+)-транслоцирующей аденозинтрифосфатазы из вакуолярных мембран Saccharomyces cerevisiae». J. Biol. Chem . 265 (12): 6726–33. doi : 10.1016/S0021-9258(19)39210-5 . PMID  2139027.
  6. ^ Kane PM, Yamashiro CT, Wolczyk DF, Neff N, Goebl M, Stevens TH (ноябрь 1990 г.). «Сплайсинг белка преобразует продукт гена дрожжей TFP1 в субъединицу 69-кДа вакуолярной H(+)-аденозинтрифосфатазы». Science . 250 (4981): 651–7. Bibcode :1990Sci...250..651K. doi :10.1126/science.2146742. PMID  2146742.
  7. ^ Swithers, Kristen S.; Soucy, Shannon M.; Gogarten, J. Peter (2012). «Роль ретикулярной эволюции в создании инноваций и сложности». International Journal of Evolutionary Biology . 2012 : 1–10. doi : 10.1155/2012/418964 . ISSN  2090-8032. PMC 3403396. PMID  22844638 . 
  8. ^ Докинз, Ричард (1976). Эгоистичный ген . Oxford University Press.
  9. ^ "UniProt: универсальная база знаний о белках". Nucleic Acids Research . 45 (D1): D158–D169. 2016-11-29. doi :10.1093/nar/gkw1099. ISSN  0305-1048. PMC 5210571. PMID 27899622  . 
  10. ^ ab Perler, FB (2002). "InBase: база данных Intein". Nucleic Acids Research . 30 (1): 383–384. doi :10.1093/nar/30.1.383. ISSN  1362-4962. PMC 99080. PMID 11752343  . 
  11. ^ Грин, Кэтлин М.; Ли, Чжун; Смит, Аарон Д.; Новикова, Ольга; Бакот-Дэвис, Вальжан Р.; Гао, Фэншань; Ху, Сайянг; Банавали, Нилеш К.; Тиле, Деннис Дж.; Ли, Хонгминь; Белфорт, Марлен (10.10.2019). «Сплайсосомальный интеин Prp8 на перекрестке сплайсинга белка и РНК». PLOS Biology . 17 (10): e3000104. doi : 10.1371/journal.pbio.3000104 . ISSN  1545-7885. PMC 6805012. PMID 31600193  . 
  12. ^ abcd Tharappel, Anil Mathew; Li, Zhong; Li, Hongmin (2022). «Интеины как мишени для лекарств и терапевтические инструменты». Frontiers in Molecular Biosciences . 9 : 821146. doi : 10.3389/fmolb.2022.821146 . ISSN  2296-889X. PMC 8861304. PMID 35211511  . 
  13. ^ ab Wall, Diana A.; Tarrant, Seanan P.; Wang, Chunyu; Mills, Kenneth V.; Lennon, Christopher W. (2021). «Ингибиторы интеина как новые противомикробные препараты: сплайсинг белков у человеческих патогенов, методы скрининга и соображения, касающиеся нецелевых объектов». Frontiers in Molecular Biosciences . 8 : 752824. doi : 10.3389/fmolb.2021.752824 . ISSN  2296-889X. PMC 8529194. PMID 34692773  . 
  14. ^ Грин, Кэтлин М.; Новикова, Ольга; Белфорт, Марлен (2018-01-24). "Динамический ландшафт интеинов эукариот". Mobile DNA . 9 (1): 4. doi : 10.1186/s13100-018-0111-x . ISSN  1759-8753. PMC 5784728. PMID  29416568 . 
  15. ^ ab Новикова, Ольга; Топилина, Наталья; Белфорт, Марлен (май 2014 г.). «Загадочное распределение, эволюция и функция интеинов». Журнал биологической химии . 289 (21): 14490–14497. doi : 10.1074/jbc.r114.548255 . ISSN  0021-9258. PMC 4031506. PMID 24695741  . 
  16. ^ Noren CJ, Wang J, Perler FB (2000). «Раскрытие химии сплайсинга белков и ее применения». Angew Chem Int Ed Engl . 39 (3): 450–66. doi :10.1002/(sici)1521-3773(20000204)39:3<450::aid-anie450>3.3.co;2-6. PMID  10671234.
  17. ^ abcde Нанда, А; Наскер, СС; Мехра, А; Панда, С; Наяк, С (16 декабря 2020 г.). «Интеины в науке: эволюция к применению». Микроорганизмы . 8 (12): 2004. doi : 10.3390/microorganisms8122004 . PMC 7765530. PMID  33339089 . 
  18. ^ abc Tori, K; Perler, FB (апрель 2011 г.). «Расширение определения интеинов класса 3 и их предполагаемого фагового происхождения». Журнал бактериологии . 193 (8): 2035–41. doi : 10.1128/JB.01407-10 . PMC 3133030. PMID  21317331 . 
  19. ^ Anraku, Y; Mizutani, R; Satow, Y (2005). «Сплайсинг белков: его открытие и структурное понимание новых химических механизмов». IUBMB Life . 57 (8): 563–74. doi : 10.1080/15216540500215499 . PMID  16118114.
  20. ^ Келли, Даниэль С.; Леннон, Кристофер В.; Ли, Чжун; Миллер, Майкл Р.; Банавали, Нилеш К.; Ли, Хонгмин; Белфорт, Марлен (19 октября 2018 г.). «Интеин хеликазы микобактериальной ДНКB как сенсор окислительного стресса». Nature Communications . 9 (1): 4363. Bibcode :2018NatCo...9.4363K. doi : 10.1038/s41467-018-06554-x . PMC 6195587 . PMID  30341292. 
  21. ^ Wu, H.; Hu, Z.; Liu, XQ (1998). «Транссплайсинг белка расщепленным интеином, кодируемым расщепленным геном DnaE Synechocystis sp. PCC6803». Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки . 95 (16): 9226–9231. Bibcode : 1998PNAS...95.9226W. doi : 10.1073/pnas.95.16.9226 . PMC 21320. PMID  9689062 . 
  22. ^ Schwarzer D, Cole PA (2005). «Полусинтез белка и лигирование экспрессированного белка: погоня за хвостом белка». Curr Opin Chem Biol . 9 (6): 561–9. doi :10.1016/j.cbpa.2005.09.018. PMID  16226484.
  23. ^ Muralidharan V, Muir TW (2006). «Лигирование белков: технология, обеспечивающая биофизический анализ белков». Nat. Methods . 3 (6): 429–38. doi :10.1038/nmeth886. PMID  16721376. S2CID  12550693.
  24. ^ de Grey, Aubrey DNJ (2000). «Митохондриальная генная терапия: арена для биомедицинского использования интеинов». Trends in Biotechnology . 18 (9): 394–399. doi :10.1016/S0167-7799(00)01476-1. ISSN  0167-7799. PMID  10942964.
  25. ^ ab Chong, Shaorong; Mersha, Fana B; Comb, Donald G; Scott, Melissa E; Landry, David; Vence, Luis M; Perler, Francine B; Benner, Jack; Kucera, Rebecca B; Hirvonen, Christine A; Pelletier, John J; Paulus, Henry; Xu, Ming-Qun (1997). "Очистка свободных рекомбинантных белков на одной колонке с использованием саморасщепляемой аффинной метки, полученной из элемента сплайсинга белка". Gene . 192 (2): 271–281. doi :10.1016/S0378-1119(97)00105-4. ISSN  0378-1119. PMID  9224900.
  26. ^ ab Fong, Baley A; Wood, David W (2010). "Экспрессия и очистка целевых белков, помеченных интеином ELP, при ферментации E. coli с высокой плотностью клеток". Microbial Cell Factories . 9 (1): 77. doi : 10.1186/1475-2859-9-77 . ISSN  1475-2859. PMC 2978133 . PMID  20959011. 
  27. ^ Син, Лей; У, Вэй; Чжоу, Бихонг; Линь, Чжанлинь (2011). «Оптимизированная экспрессия и очистка белка с использованием расщепляемых самоагрегирующихся меток». Microbial Cell Factories . 10 (1): 42. doi : 10.1186/1475-2859-10-42 . ISSN  1475-2859. PMC 3124420. PMID 21631955  . 
  28. ^ Шах, Нил Х.; Мьюир, Том В. (2013-12-24). «Интеины: дар природы химикам-белковедам». Chemical Science . 5 (2): 446–461. doi :10.1039/C3SC52951G. ISSN  2041-6539. PMC 3949740 . PMID  24634716. 
  29. ^ Huet, Gaëlle; Castaing, Jean-Philippe; Fournier, Didier; Daffé, Mamadou; Saves, Isabelle (май 2006 г.). «Сплайсинг белка SufB имеет решающее значение для функциональности SUF-машины Mycobacterium tuberculosis». Journal of Bacteriology . 188 (9): 3412–3414. doi :10.1128/JB.188.9.3412-3414.2006. ISSN  0021-9193. PMC 1447444 . PMID  16621837. 
  30. ^ Чан, Хон; Пирсон, К. Сет; Грин, Кэтлин М.; Ли, Чжун; Чжан, Цзин; Белфорт, Жорж; Шехтман, Алекс; Ли, Хунмин; Белфорт, Марлен (октябрь 2016 г.). «Изучение ингибирования интеина соединениями платины в качестве антимикробной стратегии». Журнал биологической химии . 291 (43): 22661–22670. doi : 10.1074/jbc.m116.747824 . ISSN  0021-9258. PMC 5077202. PMID 27609519  . 
  31. ^ Ли, Чжун; Тараппел, Анил Мэтью; Сюй, Джимин; Ланг, Юэкунь; Грин, Кэтлин М.; Чжан, Цзин; Линь, Цишань; Чатурведи, Судха; Чжоу, Цзя; Белфорт, Марлен; Ли, Хунминь (12.01.2021). «Низкомолекулярные ингибиторы интеина Prp8 в качестве противогрибковых средств». Труды Национальной академии наук . 118 (2): e2008815118. Bibcode : 2021PNAS..11808815L. doi : 10.1073/pnas.2008815118 . ISSN  0027-8424. PMC 7812778. PMID 33397721  . 

Дальнейшее чтение

Внешние ссылки