Цитозоль , также известный как цитоплазматический матрикс или основная плазма , [2] является одной из жидкостей, находящихся внутри клеток ( внутриклеточная жидкость (ВКЖ)). [3] Он разделен на отсеки мембранами. Например, митохондриальный матрикс разделяет митохондрию на множество отсеков.
В эукариотической клетке цитозоль окружен клеточной мембраной и является частью цитоплазмы , которая также включает митохондрии, пластиды и другие органеллы (но не их внутренние жидкости и структуры); клеточное ядро отделено. Таким образом, цитозоль представляет собой жидкую матрицу вокруг органелл. У прокариот большинство химических реакций метаболизма происходит в цитозоле, в то время как некоторые происходят в мембранах или в периплазматическом пространстве . У эукариот, хотя многие метаболические пути все еще происходят в цитозоле, другие происходят внутри органелл.
Цитозоль представляет собой сложную смесь веществ, растворенных в воде. Хотя вода составляет большую часть цитозоля, ее структура и свойства внутри клеток изучены недостаточно. Концентрации ионов , таких как натрий и калий, в цитозоле отличаются от концентраций во внеклеточной жидкости ; эти различия в уровнях ионов важны для таких процессов, как осморегуляция , клеточная сигнализация и генерация потенциалов действия в возбудимых клетках, таких как эндокринные, нервные и мышечные клетки. Цитозоль также содержит большое количество макромолекул , которые могут изменять поведение молекул посредством макромолекулярной скученности .
Хотя когда-то считалось, что это простой раствор молекул, цитозоль имеет несколько уровней организации. Они включают градиенты концентрации малых молекул, таких как кальций , большие комплексы ферментов , которые действуют вместе и принимают участие в метаболических путях , и белковые комплексы, такие как протеасомы и карбоксисомы , которые охватывают и разделяют части цитозоля.
Термин «цитозоль» был впервые введен в 1965 году HA Lardy и первоначально относился к жидкости, которая была получена путем разрушения клеток и осаждения всех нерастворимых компонентов путем ультрацентрифугирования . [4] [5] Такой растворимый клеточный экстракт не идентичен растворимой части цитоплазмы клетки и обычно называется цитоплазматической фракцией. [6]
Термин «цитозоль» теперь используется для обозначения жидкой фазы цитоплазмы в неповрежденной клетке. [6] Это исключает любую часть цитоплазмы, которая содержится внутри органелл. [7] Из-за возможности путаницы между использованием слова «цитозоль» для обозначения как экстрактов клеток, так и растворимой части цитоплазмы в неповрежденных клетках, фраза «водная цитоплазма» использовалась для описания жидкого содержимого цитоплазмы живых клеток. [5]
До этого для обозначения клеточной жидкости использовались другие термины, включая гиалоплазму [8] , не всегда как синонимы, поскольку ее природа не была хорошо понята (см. протоплазму ). [6]
Доля объема клетки, которая приходится на цитозоль, варьируется: например, в то время как этот отсек образует основную часть структуры клетки у бактерий , [9] в растительных клетках основным отсеком является большая центральная вакуоль . [10] Цитозоль в основном состоит из воды, растворенных ионов, малых молекул и крупных водорастворимых молекул (таких как белки). Большинство этих небелковых молекул имеют молекулярную массу менее 300 Да . [11] Эта смесь малых молекул необычайно сложна, поскольку разнообразие молекул, участвующих в метаболизме (метаболитов ) , огромно. Например, в растениях может быть образовано до 200 000 различных малых молекул, хотя не все они будут присутствовать в одном и том же виде или в одной клетке. [12] Оценки количества метаболитов в отдельных клетках, таких как E. coli и пекарские дрожжи, предсказывают, что образуется менее 1000. [13] [14]
Большая часть цитозоля — это вода , которая составляет около 70% от общего объема типичной клетки. [15] pH внутриклеточной жидкости составляет 7,4. [16] в то время как pH цитозоля человека колеблется от 7,0 до 7,4 и обычно выше, если клетка растет. [17] Вязкость цитоплазмы примерно такая же, как у чистой воды, хотя диффузия малых молекул через эту жидкость примерно в четыре раза медленнее, чем в чистой воде, в основном из-за столкновений с большим количеством макромолекул в цитозоле. [18] Исследования на артемии изучили, как вода влияет на функции клеток; они показали, что 20%-ное уменьшение количества воды в клетке подавляет метаболизм, причем метаболизм постепенно снижается по мере высыхания клетки, и вся метаболическая активность останавливается, когда уровень воды достигает 70% ниже нормы. [5]
Хотя вода жизненно важна для жизни, структура этой воды в цитозоле не очень хорошо изучена, в основном потому, что такие методы, как спектроскопия ядерного магнитного резонанса, дают информацию только о средней структуре воды и не могут измерить локальные изменения в микроскопическом масштабе. Даже структура чистой воды плохо изучена из-за способности воды образовывать структуры, такие как кластеры воды, посредством водородных связей . [19]
Классический взгляд на воду в клетках заключается в том, что около 5% этой воды прочно связано растворенными веществами или макромолекулами как сольватная вода , в то время как большая часть имеет ту же структуру, что и чистая вода. [5] Эта сольватная вода не активна при осмосе и может иметь другие свойства растворителя, так что некоторые растворенные молекулы исключаются, а другие концентрируются. [20] [21] Однако другие утверждают, что эффекты высоких концентраций макромолекул в клетках распространяются на весь цитозоль и что вода в клетках ведет себя совсем иначе, чем вода в разбавленных растворах. [22] Эти идеи включают предположение о том, что клетки содержат зоны воды низкой и высокой плотности, которые могут иметь широко распространенные эффекты на структуры и функции других частей клетки. [19] [23] Однако использование передовых методов ядерного магнитного резонанса для прямого измерения подвижности воды в живых клетках противоречит этой идее, поскольку она предполагает, что 85% клеточной воды ведет себя как чистая вода, в то время как остальная часть менее подвижна и, вероятно, связана с макромолекулами. [24]
Концентрации других ионов в цитозоле существенно отличаются от концентраций во внеклеточной жидкости , а цитозоль также содержит гораздо большее количество заряженных макромолекул, таких как белки и нуклеиновые кислоты, чем внешняя часть клеточной структуры.
В отличие от внеклеточной жидкости, цитозоль имеет высокую концентрацию ионов калия и низкую концентрацию ионов натрия . [27] Эта разница в концентрации ионов имеет решающее значение для осморегуляции , поскольку если бы уровни ионов были такими же внутри клетки, как и снаружи, вода постоянно поступала бы посредством осмоса - поскольку уровни макромолекул внутри клеток выше, чем их уровни снаружи. Вместо этого ионы натрия вытесняются, а ионы калия поглощаются Na⁺/K⁺-АТФазой , затем ионы калия текут по градиенту концентрации через ионные каналы селекции калия, эта потеря положительного заряда создает отрицательный мембранный потенциал . Чтобы уравновесить эту разницу потенциалов , отрицательные ионы хлорида также выходят из клетки через селективные хлоридные каналы. Потеря ионов натрия и хлорида компенсирует осмотический эффект более высокой концентрации органических молекул внутри клетки. [27]
Клетки могут справляться с еще большими осмотическими изменениями, накапливая в своем цитозоле осмопротекторы , такие как бетаины или трегалоза . [27] Некоторые из этих молекул позволяют клеткам выживать после полного высыхания и позволяют организму войти в состояние анабиоза, называемое криптобиозом . [28] В этом состоянии цитозоль и осмопротекторы становятся стекловидным твердым веществом, которое помогает стабилизировать белки и клеточные мембраны от разрушительного воздействия высыхания. [29]
Низкая концентрация кальция в цитозоле позволяет ионам кальция функционировать в качестве вторичного посредника в кальциевой сигнализации . Здесь сигнал, такой как гормон или потенциал действия, открывает кальциевый канал , так что кальций устремляется в цитозоль. [30] Это внезапное увеличение цитозольного кальция активирует другие сигнальные молекулы, такие как кальмодулин и протеинкиназа С. [ 31] Другие ионы, такие как хлорид и калий, также могут иметь сигнальные функции в цитозоле, но они недостаточно изучены. [32]
Молекулы белка, которые не связываются с клеточными мембранами или цитоскелетом , растворяются в цитозоле. Количество белка в клетках чрезвычайно велико и приближается к 200 мг/мл, занимая около 20–30% объема цитозоля. [1] Однако точно измерить, сколько белка растворено в цитозоле в неповрежденных клетках, сложно, поскольку некоторые белки, по-видимому, слабо связаны с мембранами или органеллами в целых клетках и высвобождаются в раствор при лизисе клеток . [5] Действительно, в экспериментах, где плазматическая мембрана клеток была осторожно разрушена с помощью сапонина , без повреждения других клеточных мембран, высвобождалось только около четверти клеточного белка. Эти клетки также были способны синтезировать белки, если им давали АТФ и аминокислоты, что подразумевает, что многие ферменты в цитозоле связаны с цитоскелетом. [33] Однако идея о том, что большинство белков в клетках тесно связаны в сети, называемой микротрабекулярной решеткой, теперь считается маловероятной. [34]
У прокариот цитозоль содержит геном клетки , внутри структуры, известной как нуклеоид . [35] Это нерегулярная масса ДНК и связанных с ней белков, которые контролируют транскрипцию и репликацию бактериальной хромосомы и плазмид . У эукариот геном удерживается внутри клеточного ядра , которое отделено от цитозоля ядерными порами , которые блокируют свободную диффузию любой молекулы, диаметр которой превышает примерно 10 нанометров . [36]
Эта высокая концентрация макромолекул в цитозоле вызывает эффект, называемый макромолекулярным скоплением , который возникает, когда эффективная концентрация других макромолекул увеличивается, поскольку у них меньше объема для перемещения. Этот эффект скопления может вызывать большие изменения как в скоростях , так и в положении химического равновесия реакций в цитозоле. [1] Он особенно важен из-за своей способности изменять константы диссоциации , способствуя ассоциации макромолекул, например, когда несколько белков объединяются для формирования белковых комплексов , или когда ДНК-связывающие белки связываются со своими мишенями в геноме . [37]
Хотя компоненты цитозоля не разделены на области клеточными мембранами, эти компоненты не всегда смешиваются случайным образом, и несколько уровней организации могут локализовать определенные молекулы в определенных местах внутри цитозоля. [38]
Хотя небольшие молекулы быстро диффундируют в цитозоле, градиенты концентрации все еще могут создаваться в этом отсеке. Хорошо изученным примером этого являются «кальциевые искры», которые производятся в течение короткого периода в области вокруг открытого кальциевого канала . [39] Они имеют диаметр около 2 микрометров и длятся всего несколько миллисекунд , хотя несколько искр могут объединяться, образуя более крупные градиенты, называемые «кальциевыми волнами». [40] Градиенты концентрации других небольших молекул, таких как кислород и аденозинтрифосфат, могут создаваться в клетках вокруг кластеров митохондрий , хотя они менее изучены. [41] [42]
Белки могут объединяться, образуя белковые комплексы , они часто содержат набор белков со схожими функциями, например, ферменты, которые выполняют несколько этапов в одном и том же метаболическом пути. [43] Такая организация может обеспечить каналирование субстрата , когда продукт одного фермента передается непосредственно следующему ферменту в пути без высвобождения в раствор. [44] Каналирование может сделать путь более быстрым и эффективным, чем если бы ферменты были случайным образом распределены в цитозоле, а также может предотвратить высвобождение нестабильных промежуточных продуктов реакции. [45] Хотя широкий спектр метаболических путей включает ферменты, которые тесно связаны друг с другом, другие могут включать более слабо связанные комплексы, которые очень трудно изучать вне клетки. [46] [47] Следовательно, важность этих комплексов для метаболизма в целом остается неясной.
Некоторые белковые комплексы содержат большую центральную полость, которая изолирована от остальной части цитозоля. Одним из примеров такого закрытого отсека является протеасома . [48] Здесь набор субъединиц образует полый ствол, содержащий протеазы , которые разрушают цитозольные белки. Поскольку они были бы разрушительными, если бы они свободно смешивались с остальной частью цитозоля, ствол закрыт набором регуляторных белков, которые распознают белки с сигналом, направляющим их на деградацию ( убиквитиновая метка), и направляют их в протеолитическую полость. [49]
Другой большой класс белковых отсеков — это бактериальные микроотсека , которые состоят из белковой оболочки, инкапсулирующей различные ферменты. [50] Эти отсеки обычно имеют размер около 100–200 нанометров в поперечнике и состоят из взаимосвязанных белков. [51] Хорошо изученным примером является карбоксисома , которая содержит ферменты, участвующие в фиксации углерода , такие как RuBisCO . [52]
Несвязанные с мембраной органеллы могут образовываться в виде биомолекулярных конденсатов , которые возникают в результате кластеризации, олигомеризации или полимеризации макромолекул , вызывая коллоидное фазовое разделение цитоплазмы или ядра.
Хотя цитоскелет не является частью цитозоля, наличие этой сети филаментов ограничивает диффузию крупных частиц в клетке. Например, в нескольких исследованиях частицы-трассеры размером более 25 нанометров (примерно размером с рибосому ) [53] были исключены из частей цитозоля по краям клетки и рядом с ядром. [54] [55] Эти «исключающие отсеки» могут содержать гораздо более плотную сетку актиновых волокон, чем остальная часть цитозоля. Эти микродомены могут влиять на распределение крупных структур, таких как рибосомы и органеллы, внутри цитозоля, исключая их из некоторых областей и концентрируя их в других. [56]
Цитозоль является местом множества клеточных процессов. Примерами этих процессов являются передача сигнала от клеточной мембраны к участкам внутри клетки, таким как клеточное ядро , [57] или органеллы. [58] Этот отсек также является местом многих процессов цитокинеза после разрушения ядерной мембраны в митозе . [59] Другая важная функция цитозоля заключается в транспортировке метаболитов из места их производства туда, где они используются. Это относительно просто для водорастворимых молекул, таких как аминокислоты, которые могут быстро диффундировать через цитозоль. [18] Однако гидрофобные молекулы, такие как жирные кислоты или стерины , могут транспортироваться через цитозоль с помощью специфических связывающих белков, которые перемещают эти молекулы между клеточными мембранами. [60] [61] Молекулы, поступившие в клетку путем эндоцитоза или находящиеся на пути к секреции, также могут транспортироваться через цитозоль внутри везикул , [62] которые представляют собой небольшие сферы липидов, перемещаемые вдоль цитоскелета с помощью моторных белков . [63]
Цитозоль является местом большей части метаболизма у прокариот [9] и значительной доли метаболизма у эукариот. Например, у млекопитающих около половины белков в клетке локализованы в цитозоле [64] Наиболее полные данные имеются по дрожжам, где метаболические реконструкции показывают, что большинство как метаболических процессов, так и метаболитов происходят в цитозоле [65] Основные метаболические пути, которые происходят в цитозоле у животных, это биосинтез белка , пентозофосфатный путь , гликолиз и глюконеогенез [66] Локализация путей может быть различной у других организмов, например, синтез жирных кислот происходит в хлоропластах у растений [67] [68] и в апикопластах у апикомплексов [69 ]