Грамотрицательные бактерии — это бактерии , которые, в отличие от грамположительных бактерий , не сохраняют окраску кристаллическим фиолетовым, используемую в методе окрашивания по Граму для дифференциации бактерий. [1] Их определяющей характеристикой является их клеточная оболочка , которая состоит из тонкой пептидогликановой клеточной стенки, зажатой между внутренней ( цитоплазматической ) мембраной и внешней мембраной . [2] Эти бактерии встречаются во всех средах, поддерживающих жизнь на Земле .
В этой категории примечательные виды включают модельный организм Escherichia coli , а также различные патогенные бактерии , такие как Pseudomonas aeruginosa , Chlamydia trachomatis и Yersinia pestis . Они представляют значительные проблемы в области медицины из-за своей внешней мембраны, которая действует как защитный барьер против многочисленных антибиотиков (включая пенициллин ), детергентов , которые обычно повреждают внутреннюю клеточную мембрану, и антимикробного фермента лизоцима, вырабатываемого животными как часть их врожденной иммунной системы . Кроме того, внешний слой этой мембраны содержит сложный липополисахарид (ЛПС), липидный компонент А которого может вызвать токсическую реакцию, когда бактерии лизируются иммунными клетками. Эта реакция может привести к септическому шоку , что приводит к низкому кровяному давлению , дыхательной недостаточности , снижению доставки кислорода и лактоацидозу . [3]
Было разработано несколько классов антибиотиков для воздействия на грамотрицательные бактерии, включая аминопенициллины , уреидопенициллины , цефалоспорины , комбинации бета- лактамов и ингибиторов бета-лактамазы ( например, пиперациллин-тазобактам ), антагонисты фолиевой кислоты , хинолоны и карбапенемы . Многие из этих антибиотиков также действуют на грамположительные бактерии. Антибиотики, которые специально нацелены на грамотрицательные организмы, включают аминогликозиды , монобактамы (например, азтреонам ) и ципрофлоксацин .
Обычные грамотрицательные (LPS-дидермальные) бактерии демонстрируют следующие характеристики : [ необходима ссылка ]
Наряду с формой клеток, окрашивание по Граму является быстрым диагностическим инструментом и когда-то использовалось для группировки видов в подразделении Bacteria. Исторически царство Monera было разделено на четыре подразделения на основе окрашивания по Граму: Firmacutes (+), Gracillicutes (−), Mollicutes (0) и Mendocutes (var.). [4] С 1987 года монофилия грамотрицательных бактерий была опровергнута молекулярными исследованиями . [ 5] Однако некоторые авторы, такие как Кавальер-Смит , по-прежнему рассматривают их как монофилетический таксон (хотя и не кладу ; его определение монофилии требует одного общего предка, но не требует голофилии , свойства, при котором все потомки охватываются таксоном ) и называют группу подцарством « Negibacteria». [6]
Бактерии традиционно классифицируются на основе их реакции окрашивания по Граму на грамположительные и грамотрицательные бактерии. Имеющие только одну мембрану, грамположительные бактерии также известны как монодермальные бактерии , в то время как грамотрицательные бактерии, имеющие две мембраны, также известны как дидермальные бактерии . Традиционно считалось, что группы представляют собой родословные, т. е. дополнительная мембрана развивалась только один раз, так что грамотрицательные бактерии более тесно связаны друг с другом, чем с любыми грамположительными бактериями. Хотя это часто верно, в некоторых случаях система классификации дает сбой, и группировки родословных не соответствуют результату окрашивания. [7] [8] [9] [10] Таким образом, окрашивание по Граму не может быть надежно использовано для оценки семейных отношений бактерий. Тем не менее, окрашивание часто дает надежную информацию о составе клеточной мембраны, различая наличие или отсутствие внешней липидной мембраны . [7] [11]
Из этих двух структурно различных групп прокариотических организмов монодермальные прокариоты считаются предковыми. На основании ряда различных наблюдений, включая то, что грамположительные бактерии наиболее чувствительны к антибиотикам , а грамотрицательные бактерии, в целом, устойчивы к антибиотикам, было высказано предположение, что внешняя клеточная мембрана у грамотрицательных бактерий (дидерм) развилась как защитный механизм против давления отбора антибиотиков . [7] [8] [11] [12] Некоторые бактерии, такие как Deinococcus , которые окрашиваются в грамположительный цвет из-за наличия толстого слоя пептидогликана , но также обладают внешней клеточной мембраной, предлагаются в качестве промежуточных звеньев в переходе между монодермальными (грамположительными) и дидермальными (грамотрицательными) бактериями. [7] [12] Дидермальные бактерии также можно дополнительно дифференцировать на простые дидермы, лишенные липополисахарида (ЛПС); архетипические дидермовые бактерии, у которых внешняя клеточная мембрана содержит липополисахарид; и дидермовые бактерии, у которых внешняя клеточная мембрана состоит из миколовой кислоты (например, Mycobacterium ). [9] [10] [12] [13]
Традиционная группа грамотрицательных бактерий LPS- дидерм (например, Pseudomonadota , Aquificota , Chlamydiota , Bacteroidota , Chlorobiota , « Cyanobacteria », Fibrobacterota , Verrucomicrobiota , Planctomycetota , Spirochaetota , Acidobacteriota ; « Hydrobacteria ») однозначно идентифицируется несколькими консервативными сигнатурными инделями (CSI) в белке HSP60 ( GroEL ). Кроме того, ряд бактериальных таксонов (включая Negativicutes , Fusobacteriota , Synergistota и Elusimicrobiota ), которые являются либо частью филума Bacillota ( группа монодерм), либо ветвями в его непосредственной близости, также обладают структурой клеток дидерм. [10] [12] [13] У них отсутствует сигнатура GroEL . [12] Наличие этого CSI во всех секвенированных видах обычных грамотрицательных бактерий, содержащих липополисахарид, свидетельствует о том, что эти типы бактерий образуют монофилетическую кладу и что никакой потери внешней мембраны у какого-либо вида из этой группы не произошло. [12]
Протеобактерии являются основным суперфилумом грамотрицательных бактерий, включая E. coli , Salmonella , Shigella и другие Enterobacteriaceae , Pseudomonas , Moraxella , Helicobacter , Stenotrophomonas , Bdellovibrio , уксуснокислые бактерии , Legionella и т. д . Другие известные группы грамотрицательных бактерий включают цианобактерии , спирохеты , зеленые серные и зеленые несерные бактерии [14] . [ необходима ссылка ]
Медицински значимые грамотрицательные диплококки включают четыре типа, вызывающие заболевания, передающиеся половым путем ( Neisseria gonorrhoeae [15] ), менингит ( Neisseria meningitidis [16] ) и респираторные симптомы ( Moraxella catarrhalis , [17]). Коккобацилла Haemophilus influenzae — еще один медицински значимый тип кокков. [18]
Медицински значимые грамотрицательные бациллы включают множество видов. Некоторые из них вызывают в первую очередь респираторные проблемы ( Klebsiella pneumoniae , Legionella pneumophila , Pseudomonas aeruginosa ), в первую очередь мочеполовые проблемы ( Escherichia coli , Proteus mirabilis , Enterobacter cloacae , Serratia marcescens ) и в первую очередь желудочно-кишечные проблемы ( Helicobacter pylori , Salmonella enteritidis , Salmonella typhi ). [ необходима цитата ]
Грамотрицательные бактерии, связанные с внутрибольничными инфекциями , включают Acinetobacter baumannii , которые вызывают бактериемию , вторичный менингит и вентилятор-ассоциированную пневмонию в отделениях интенсивной терапии больниц .
Трансформация — один из трех процессов горизонтального переноса генов , при котором экзогенный генетический материал переходит от одной бактерии к другой, два других — это конъюгация (передача генетического материала между двумя бактериальными клетками, находящимися в прямом контакте) и трансдукция (инъекция чужеродной ДНК вирусом- бактериофагом в бактерию-хозяина). [19] [20] При трансформации генетический материал проходит через промежуточную среду, и его поглощение полностью зависит от бактерии-реципиента. [19]
По состоянию на 2014 год было известно о 80 видах бактерий, способных к трансформации, примерно поровну между грамположительными и грамотрицательными бактериями; это число может быть завышенным, поскольку несколько отчетов подкреплены отдельными статьями. [19] Трансформация изучалась у медицински важных видов грамотрицательных бактерий, таких как Helicobacter pylori , Legionella pneumophila , Neisseria meningitidis , Neisseria gonorrhoeae , Haemophilus influenzae и Vibrio cholerae . [21] Она также изучалась у грамотрицательных видов, обнаруженных в почве, таких как Pseudomonas stutzeri , Acinetobacter baylyi , и грамотрицательных фитопатогенов, таких как Ralstonia solanacearum и Xylella fastidiosa . [21]
Одной из уникальных характеристик грамотрицательных бактерий является структура бактериальной внешней мембраны . Внешний листок этой мембраны содержит липополисахарид (ЛПС), часть липида А которого действует как эндотоксин . [1] Если грамотрицательные бактерии попадают в кровеносную систему , ЛПС может вызвать врожденный иммунный ответ , активируя иммунную систему и вырабатывая цитокины (гормональные регуляторы). Это приводит к воспалению и может вызвать токсическую реакцию, приводящую к лихорадке, учащенному дыханию и низкому кровяному давлению . Вот почему некоторые инфекции грамотрицательными бактериями могут привести к опасному для жизни септическому шоку . [3]
Внешняя мембрана защищает бактерии от нескольких антибиотиков , красителей и детергентов , которые обычно повреждают либо внутреннюю мембрану, либо клеточную стенку (состоящую из пептидогликана ). Внешняя мембрана обеспечивает этим бактериям устойчивость к лизоциму и пенициллину . Периплазматическое пространство (пространство между двумя клеточными мембранами) также содержит ферменты , которые расщепляют или модифицируют антибиотики. Препараты, обычно используемые для лечения грамотрицательных инфекций, включают амино-, карбокси- и уреидопенициллины ( ампициллин , амоксициллин , пиперциллин , тикарциллин ). Эти препараты можно комбинировать с ингибиторами бета-лактамаз для борьбы с наличием ферментов, которые могут переваривать эти препараты (известных как бета-лактамазы ) в периплазматическом пространстве. Другие классы препаратов, которые имеют грамотрицательный спектр, включают цефалоспорины , монобактамы ( азтреонам ), аминогликозиды, хинолоны , макролиды , хлорамфеникол , антагонисты фолиевой кислоты и карбапенемы . [22]
Прилагательные грамположительный и грамотрицательный происходят от фамилии Ганса Христиана Грама , датского бактериолога; как прилагательные-эпонимы , их начальная буква может быть как заглавной G , так и строчной g , в зависимости от того, какое руководство по стилю (например, руководство CDC ), если таковое имеется, регламентирует написанный документ. [23] Это более подробно объясняется в разделе Окрашивание по Граму § Орфографическое примечание .